IBL百日咳桿菌IgM檢測試劑
 

1. 用途

酶聯法定(ding)性(xing)及定(ding)量測定(ding)人血清/血漿中百(bai)日咳桿菌毒素(PT) IgG 抗體水平(ping)。

2. 摘(zhai)要

百日咳是一種由百日咳博德特氏菌（Bordetella pertussis）引起的(de)呼吸道疾病，可以通過空氣傳播傳播。 革蘭氏陰性桿菌會產生一系列生物活(huo)性分(fen)子，這些化(hua)合(he)物或(huo)在致(zhi)病或(huo)在針(zhen)對百日咳的(de)免(mian)疫過程中(zhong)出(chu)現，并表現出(chu)不(bu)同的(de)影(ying)響。其中(zhong)百日咳毒素(su)（pt）、絲狀血細胞凝(ning)集素（fha）和不同脂多糖（lps）等已進行(xing)了表(biao)征研究。

百日(ri)咳顯示高傳播率（未接種(zhong)疫苗的家庭(ting)成員(yuan)的感染率(lv)超過(guo) 90％）并且可導致嚴重疾病，特別是對于幼兒(er)。從1980 年至(zhi) 1989 年一年內的 10749 名患(huan)者中，69％被(bei)送入醫院，22％患(huan)有(you)肺炎，0.9％患有腦(nao)病，0.6％死于肺炎。對(dui)于年齡(ling)較大的兒童(tong)和成人(ren)（包(bao)括已接(jie)種(zhong)疫苗的人(ren)）也通過不(bu)明顯支氣管炎或上呼(hu)吸道發炎觀察到(dao)感(gan)染。無(wu)癥(zheng)狀的病(bing)例也很常見(jian)。

百日咳疾病或百日咳疫(yi)(yi)苗免(mian)疫(yi)(yi)后的血清學反應采用凝集試驗(yan)、沉淀(dian)素，補體(ti)結合和酶聯(lian)免(mian)疫(yi)(yi)吸(xi)附試驗(yan)（ELISA） 測(ce)定(ding)。 對(dui)于(yu) ELISA 測(ce)定，博德特氏菌抗原（包括毒素(su)，FHA 和 LPS, U/ml）與固相支持物結(jie)合，方法靈敏(min)、易于操作，測定單一血(xue)清(qing)的血(xue)清(qing)陽性并通過(guo)測定IgM 和 IgA 來判斷近(jin)博德特(te)氏菌感染(ran)情況(kuang)。

與其他(ta)博(bo)德特氏菌屬(shu)蛋白相(xiang)比，百日咳毒素（PT）具有高(gao)度特異性。 PT 也是眾多疫苗的組(zu)成部分。

3. 檢測(ce)原理

基于夾心法固相酶聯吸附(fu)檢測（ELISA）原(yuan)理。微孔(kong)板空中包(bao)被抗原(yuan)，樣品中含有針對抗原(yuan)特異結合抗體（人(ren)IgG）則可以(yi)通(tong)過二次酶聯抗體（E-Ab）檢測(ce)(ce)到(dao)，加入顯色(se)底物，酶解反應顯色(se)，顏色(se)深淺(qian)與(yu)檢測(ce)(ce)吸附的 IgG 水(shui)平(ping)成正(zheng)比，以此通過(guo)顏色判斷樣品中IgG 的存在，并(bing)通過標曲定量測定IgG 的(de)濃度(du)水平(ping)。

4. 注意事項

1. 僅供研究專業用途使用。

2. 檢測(ce)前(qian)，完整仔(zi)細閱讀(du)隨試(shi)劑盒內(nei)附的有效版本說明書，確保充(chong)分理解全部(bu)內(nei)容。

3. 若試劑盒(he)包裝破損，請于收到試劑盒(he)一(yi)周內(nei)書面聯系 IBL 或供貨商。不要使(shi)用破損(sun)的試劑進(jin)行檢(jian)測。

4. 采用(yong)同批(pi)次同效(xiao)期(qi)試(shi)(shi)劑(ji)進行檢測，不(bu)(bu)同批(pi)次的(de)試(shi)(shi)劑(ji)不(bu)(bu)得混用(yong)。不(bu)(bu)要使用(yong)過(guo)期(qi)試(shi)(shi)劑(ji)。

5. 遵守(shou)良好實驗室操作規范及安全指南，必要時(shi)穿(chuan)戴實驗服、一次性乳膠(jiao)手套及護目鏡。

6. 試(shi)劑盒中有(you)害成分接觸后(hou)可能刺激眼睛和皮膚。詳情見盒內材(cai)料（MATERIALS SUPPLIED） 及標簽(qian)。另外，IBL 網上也提供(gong)了產品相(xiang)關(guan)《Material Safety Data Sheets》供下載，或直接尋求 IBL 索(suo)取。

7. 化學(xue)品及制備或(huo)使用過(guo)的試劑必(bi)須當作有(you)害廢物(wu)依照國家(jia)生物(wu)有(you)害及安(an)全指(zhi)南或(huo)法(fa)規進行處理。

8. 清(qing)潔人員在處理潛在有(you)害物品時應(ying)有(you)專(zhuan)業人士指導。

9. 避免(mian)接觸終(zhong)止液(ye)，否則可(ke)能引起皮膚(fu)過(guo)敏及灼(zhuo)傷。

10. 部分試劑含(han)疊氮(dan)鈉(NaN3) 防腐劑(ji)。若(ruo)接觸眼睛(jing)或(huo)皮膚，立即用水沖洗。NaN3 可(ke)與(yu)鉛和銅管發(fa)生反應形(xing)成具有爆炸(zha)性(xing)的疊氮金屬物。因此，處理試劑時(shi)，要(yao)用大(da)量水沖洗避(bi)免疊氮物質的積累。

11. 試(shi)劑盒(he)中含有人(ren)血清或血漿的試(shi)劑均(jun)經過檢(jian)測，顯示(shi)抗 HIV I/II、HBsAg 及(ji) 抗 HCV 均為陰(yin)性。盡管如此， 但不能(neng)排(pai)除這些及其(qi)他傳染(ran)因子的存在，因此使用(yong)及處(chu)理時，應按潛在生(sheng)物有害物處(chu)理。

5. 保存及(ji)穩(wen)定性

試(shi)劑盒常溫條件運輸(shu)，保存(cun)應在 2-8 °C。遠離熱源或陽光照射。樣本及制備試(shi)劑(ji)的(de)保(bao)存與穩(wen)定性在后面相應章節(jie)有述。

未(wei)開(kai)封的試(shi)劑在注(zhu)明的效(xiao)期內穩定。試(shi)劑盒初次開(kai)封后(hou)，微孔(kong)板(ban)裝(zhuang)在密封袋密封及試(shi)劑瓶蓋緊(jin)放在 2-8 °C 可以穩定保存 3 個月(yue)。

6. 樣品(pin)采(cai)集(ji)與保存(cun)

血(xue)清(qing)、血(xue)漿 (EDTA, 肝素處理)

8. 需要但(dan)未(wei)提供的實驗材(cai)料

1. 微量(liang)移液器 (Eppendorf 多通道(dao)移液(ye)器(qi)或類似產品, < 3% CV)，量程： 5、 50、100、500 µL

2. 校正過的(de)檢(jian)測(ce)裝置

3. 用于樣品稀釋的管(guan)子 (1 mL)

4. 8 通(tong)道微量移液器，及(ji)試劑儲槽

5. 洗瓶、自(zi)動或半自(zi)動洗板(ban)機

6. 酶標(biao)儀，可以讀取 450 nm (校正波(bo)長 600-650 nm) 的吸(xi)光(guang)值

7. 雙蒸水或去(qu)離子水

8. 吸水紙(zhi)巾、移液(ye)槍頭(tou)、計時器

9. 操(cao)作注意事項

1. 任何(he)不當處理樣品或修改測試程序(xu)都可(ke)能影(ying)響結果。 要求的移液量、孵育(yu)時間、溫度和(he)預處理步驟必須嚴格按照說(shuo)明書進行(xing)。 僅使用經過校準的移液器和(he)檢測設備。

2. 測試(shi)開(kai)始后，所(suo)(suo)有(you)步(bu)驟都應(ying)該(gai)不間斷(duan)地完成(cheng)。 確保在適當的時(shi)間準備好(hao)所(suo)(suo)需的試(shi)劑、材料和(he)(he)設備。 允(yun)許(xu)所(suo)(suo)有(you)試(shi)劑和(he)(he)樣(yang)品達(da)到室溫（18-25oC），并在使用前輕輕旋轉每(mei)瓶液體試(shi)劑和樣(yang)品。 混合試(shi)劑不要起(qi)泡。

3. 避免污(wu)染(ran)試劑，移(yi)液器和孔/管。 為每個組份和(he)樣品移取時使用新的一次性(xing)塑料移液(ye)器吸頭(tou)。 瓶蓋不要互換(huan)。未使用的(de)試劑瓶要(yao)始終蓋上。 不要(yao)使用用過的(de)板(ban)孔/試(shi)管或(huo)試(shi)劑(ji)。

4. 使用(yong)移液方案驗證合(he)適的板(ban)布局(ju)。

IBL百日咳桿菌IgM檢測試劑