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IBL百日咳(ke)桿(gan)菌IgG檢測(ce)試劑：酶(mei)聯(lian)法定性及定量(liang)測(ce)定人血清或血漿(jiang)中百日咳(ke)博德特氏菌（Bordetella pertussis）毒(du)素（PT） IgG 抗體水(shui)平。基于夾心(xin)法固相酶(mei)聯(lian)吸(xi)附檢測(ce)（ELISA）原理。微孔(kong)板(ban)空中包被抗原，樣品中含有針(zhen)對(dui)抗原特異結(jie)合(he)抗體（人IgG）則可以通(tong)過(guo)二次酶(mei)聯(lian)抗體（E-Ab）檢測(ce)到(dao)，加(jia)入顯色底物，酶(mei)解反應(ying)顯色，顏(yan)色深淺與檢測(ce)吸(xi)附的 IgG 水(shui)平成正比，以此(ci)通(tong)過(guo)顏(yan)色判斷(duan)。
更(geng)新時間：2019-05-08
IBL百日咳桿菌IgG檢測試劑
1. 用途
酶(mei)聯(lian)法定性及定量測定人血(xue)清/血漿中百日咳桿菌毒素(PT) IgG 抗(kang)體水平(ping)。
百日咳是一種由百日咳博德特氏菌（Bordetella pertussis）引起的呼吸道疾(ji)病(bing)，可以通過(guo)空氣(qi)傳播(bo)(bo)傳播(bo)(bo)。 革蘭氏陰性(xing)桿菌會產生一系列生物(wu)活(huo)性(xing)分子，這些化合物(wu)或在致病(bing)或在針對百(bai)日咳的免疫(yi)過(guo)程(cheng)中(zhong)出(chu)現(xian)，并表現(xian)出(chu)不同的影響。其中(zhong)百(bai)日咳毒(du)素（pt）、絲狀血(xue)細胞凝集素（fha）和不同脂(zhi)多糖(tang)（lps）等已(yi)進行了表征研(yan)究。
百日咳顯(xian)示(shi)高傳(chuan)播率（未接(jie)種疫苗的家庭成(cheng)員的感染率超(chao)過 90％）并且可(ke)導致嚴重疾(ji)病，特別(bie)是對于幼(you)兒。從1980 年至 1989 年一年內的 10749 名患者(zhe)中，69％被送(song)入(ru)醫院，22％患(huan)有肺(fei)炎(yan)，0.9％患有腦病，0.6％死于肺炎。對(dui)于年齡較(jiao)大的(de)兒童和(he)成人（包括已接種疫苗的(de)人）也通過不(bu)明顯支氣(qi)管(guan)炎(yan)或上呼吸(xi)道發炎(yan)觀察(cha)到感染。無癥(zheng)狀的病(bing)例也很常(chang)見。
百日(ri)咳疾病(bing)或(huo)百日(ri)咳疫(yi)苗(miao)免疫(yi)后的(de)血(xue)清學反應采用凝集(ji)試驗、沉(chen)淀素，補體(ti)結合和酶聯免疫(yi)吸附試驗（ELISA） 測定。 對(dui)于 ELISA 測定，博德特氏菌抗原（包括毒素，FHA 和 LPS, U/ml）與固相支持物結合，方法(fa)靈敏、易(yi)于操作，測(ce)定(ding)單(dan)一血清的(de)血清陽性(xing)并通過測(ce)定(ding)IgM 和 IgA 來判(pan)斷近博德特氏菌感(gan)染情況。
與其(qi)他(ta)博德(de)特氏菌屬蛋白(bai)相比，百日咳(ke)毒素（PT）具(ju)有高度特(te)異(yi)性(xing)。 PT 也是(shi)眾多疫苗的(de)組成(cheng)部分(fen)。
基于夾心法固相酶聯(lian)吸附(fu)檢(jian)測（ELISA）原理。微孔板(ban)空中包(bao)被(bei)抗原，樣(yang)品中含(han)有針對抗原特異結合抗體（人(ren)IgG）則可(ke)以通過(guo)二(er)次酶(mei)聯抗體（E-Ab）檢測到，加入(ru)顯(xian)色(se)底物，酶解反應顯(xian)色(se)，顏色(se)深淺與檢測吸附的 IgG 水平成正比，以此通(tong)過顏(yan)色(se)判斷樣品中IgG 的存在，并通(tong)過標(biao)曲定量測(ce)定IgG 的(de)濃度水(shui)平(ping)。
1. 僅供研究專業用(yong)(yong)途(tu)使用(yong)(yong)。
2. 檢測(ce)前，完整仔細閱讀(du)隨試(shi)劑盒內附(fu)的有(you)效版本說明書，確(que)保充分(fen)理解全部(bu)內容。
3. 若試劑(ji)盒包裝破損，請于收(shou)到試劑(ji)盒一周(zhou)內書面聯系 IBL 或供貨商。不要使用破損的試劑進(jin)行檢(jian)測。
4. 采(cai)用同批次(ci)同效期試劑進行檢測，不(bu)同批次(ci)的試劑不(bu)得混用。不(bu)要(yao)使用過期試劑。
5. 遵守(shou)良好實(shi)驗室操作(zuo)規范及安全(quan)指南，必(bi)要時(shi)穿戴實(shi)驗服、一次性乳膠手(shou)套及護(hu)目鏡。
6. 試劑(ji)盒中有害(hai)成(cheng)分接觸后可能(neng)刺激(ji)眼睛和皮膚。詳情(qing)見盒內材料（MATERIALS SUPPLIED） 及標簽(qian)。另外，IBL 網上也提供了產(chan)品相關《Material Safety Data Sheets》供下載(zai)，或(huo)直接尋求 IBL 索(suo)取(qu)。
7. 化學品(pin)及制備或使用過(guo)的試劑必須當作有害廢物依(yi)照國家(jia)生物有害及安(an)全指南或法(fa)規(gui)進行處理。
8. 清潔人員(yuan)在(zai)處理(li)潛在(zai)有(you)(you)害物(wu)品時應(ying)有(you)(you)專業人士(shi)指導。
9. 避免接觸(chu)終止液，否則(ze)可能引起皮(pi)膚(fu)過(guo)敏及灼傷。
10. 部分試劑含(han)疊氮(dan)鈉(NaN3) 防腐劑。若接(jie)觸眼睛或皮膚(fu)，立即用(yong)水沖洗。NaN3 可與鉛和(he)銅管發生反應(ying)形成具有(you)爆炸性的疊氮(dan)(dan)金屬物(wu)(wu)。因此(ci)，處(chu)理試劑時，要用大(da)量(liang)水沖(chong)洗避免(mian)疊氮(dan)(dan)物(wu)(wu)質的積累。
11. 試劑盒(he)中含(han)有人(ren)血清或(huo)血漿(jiang)的試劑均經過(guo)檢測，顯示抗 HIV I/II、HBsAg 及 抗 HCV 均為陰性。盡管(guan)如(ru)此(ci)， 但不能排除這些及(ji)其他(ta)傳染因子的存(cun)在，因此(ci)使用及(ji)處(chu)理時，應按(an)潛在生物有害物處(chu)理。
5. 保(bao)存及穩定(ding)性(xing)
試劑盒(he)常(chang)溫條件(jian)運(yun)輸，保存(cun)應在 2-8 °C。遠離熱源或陽光照射。樣本及制(zhi)備試劑的(de)保(bao)存(cun)與穩(wen)定性在后(hou)面相(xiang)應章節有述。
未開(kai)封的(de)試劑(ji)在(zai)(zai)注明的(de)效期內穩定。試劑(ji)盒初次開(kai)封后(hou)，微孔板裝(zhuang)在(zai)(zai)密封袋(dai)密封及試劑(ji)瓶蓋(gai)緊放在(zai)(zai) 2-8 °C 可以穩定保存 3 個月。
遵照常規靜脈采(cai)(cai)血(xue)注(zhu)意事項(xiang)。從(cong)采(cai)(cai)血(xue)開始直至檢(jian)測(ce)(ce)(ce)時(shi)段(duan)保持血(xue)樣(yang)化(hua)學屬(shu)性完整性是(shi)十分重要的。檢(jian)測(ce)(ce)(ce)時(shi)避免采(cai)(cai)用(yong)發生重度溶血(xue)、黃疸或嚴重脂(zhi)血(xue)癥(zheng)的樣(yang)品。外(wai)觀渾濁的樣(yang)品檢(jian)測(ce)(ce)(ce)前(qian)要進行離(li)心(xin)去除(chu)顆(ke)粒物。 | |||
保存: | 2-8 °C | -20 °C | 遠(yuan)離(li)熱源和日光照射 |
穩定性: | 7 天 | > 7 天 | 避免反復(fu)凍融 |
7. 試劑盒內提供的物(wu)品 | |||
數量(liang) | 標識(shi) | 組分 | |||
1 x 12 x 8 | MTP | 微孔板 |
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可拆(chai)卸板條，包被有特定抗原。 |
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1 x 15 mL |
ENZCONJ IgG | 酶聯 IgG |
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紅(hong)色瓶蓋，即用試劑。內含(han)：抗(kang)人 IgG 且偶聯過氧化(hua)物酶的(de)抗(kang)體 | |||||
含蛋白的緩沖液(ye), 0.01 %甲基異噻(sai)唑啉酮, 0.01 % 溴硝基二噁烷 | |||||
及(ji) 5 mg/L ProClin。 |
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1 x 4 x 2 mL |
CAL A-D
| 標準品 A-D |
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0; 25; 50; 150 IU/mL. 即用試劑(ji)。 |
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標準(zhun)品 A = 陰性(xing)對照 | 標準品 B = 閾值判斷對(dui)照 | ||||
標準品 C = 弱陽(yang)性對(dui)照 | 標準品 D = 陽性對照 | ||||
標準品按單位 (IU) WHO 標(biao)準 06/140 進行過(guo)校正 | |||||
內(nei)含： 抗(kang)百日(ri)咳毒(du)素(su)(PT)的(de) IgG 抗體及 PBS 稀釋過的人血清(qing)、 | |||||
0.01 %甲基異噻唑啉酮及 0.01 %溴硝基二噁(wu)烷。 | |||||
1 x 60 mL | DILBUF | 稀釋(shi)緩沖液 |
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即用試劑。內含： PBS 緩沖液、BSA, < 0.1 % NaN3。 | |||||
1 x 60 mL | WASHBUF |
| CONC | 濃縮洗液(ye) (10x) |
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內含: PBS 緩沖液、吐溫 20。 |
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1 x 15 mL | TMB SUBS | TMB 底物液 |
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即用試劑，內(nei)含(han)四甲基聯苯胺（TMB）。 | |||||
1 x 15 mL | TMB STOP | TMB 終(zhong)止液(ye) |
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即用試劑， 0.5 M H2SO4. |
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2 x | FOIL | 粘性鋁箔 |
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供孵育時蓋住微孔板使用。 |
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1 x | BAG | 塑(su)料(liao)袋 |
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密封(feng)袋，用于未使用板條的干燥(zao)保存。 | |||||
1. 微量移液器 (Eppendorf 多(duo)通道(dao)移液(ye)器或類似產品, < 3% CV)，量(liang)程： 5、 50、100、500 µL
2. 校正過(guo)的檢測裝置
3. 用于(yu)樣品稀釋的管(guan)子 (1 mL)
4. 8 通道微量移液器，及試劑儲槽(cao)
5. 洗瓶、自動或(huo)半自動洗板(ban)機
6. 酶標儀，可以讀取 450 nm (校(xiao)正(zheng)波(bo)長 600-650 nm) 的吸光值(zhi)
7. 雙蒸水或去離子水
8. 吸水(shui)紙(zhi)巾、移液槍頭、計時器
1. 任何不當處理樣(yang)品(pin)或(huo)修改測試(shi)程序都可能(neng)影響結果。 要求的移液(ye)量、孵育時間、溫度(du)和預(yu)處理步驟必須嚴格(ge)按(an)照說(shuo)明書進行。 僅使用(yong)經過(guo)校準的移(yi)液器和檢測設(she)備。
2. 測(ce)試開始后，所有(you)步驟都應(ying)該不間(jian)斷地完(wan)成。 確保(bao)在適當(dang)的(de)時間(jian)準備好(hao)所需的(de)試劑(ji)、材料和(he)設備。 允許所有(you)試劑(ji)和(he)樣品達(da)到室溫（18-25oC），并在(zai)使用前輕輕旋轉每瓶液體(ti)試(shi)(shi)劑和樣品。 混合試(shi)(shi)劑不要起泡(pao)。
3. 避免污染(ran)試(shi)劑(ji)，移(yi)液器和孔/管。 為每個組(zu)份(fen)和樣品(pin)移取(qu)時使用新(xin)的一(yi)次性塑(su)料移液器(qi)吸頭。 瓶蓋(gai)不要(yao)互換。未使用(yong)(yong)的(de)試(shi)劑瓶要始終蓋上。 不(bu)要使用(yong)(yong)用(yong)(yong)過(guo)的(de)板孔/試(shi)管或試(shi)劑。
4. 使用移液方(fang)案驗證(zheng)合適(shi)的板(ban)布(bu)局。
IBL百日咳桿菌IgG檢測試劑
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