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德國IBL寨卡病毒抗體IgM檢測試劑

【產品名(ming)稱】

通用(yong)名(ming)稱：寨(zhai)卡(ka)病毒(du)IgM檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒（酶(mei)聯免疫法）

【產品規格】

96T/盒

【預(yu)期(qi)用途】

試劑盒可用于人血(xue)清和血(xue)漿（檸檬酸鹽）中(zhong)寨卡病毒IgM抗(kang)體(ti)的定性檢測。

【檢測原理(li)】

試劑(ji)盒采用酶聯(lian)免疫法。微(wei)孔中預包被(bei)有抗人(ren)IgG，用于結合樣品(pin)中相(xiang)應(ying)的(de)(de)抗體。洗板后，去除非結合的(de)(de)樣品(pin)。再(zai)加(jia)入(ru)(ru)寨(zhai)卡病毒(du)(du)原液(ye)(ye)，再(zai)次洗板后，再(zai)加(jia)入(ru)(ru)生物(wu)(wu)素(su)化的(de)(de)寨(zhai)卡病毒(du)(du)抗體。加(jia)入(ru)(ru)鏈霉親和素(su)標記(ji)結合物(wu)(wu)（酶(mei)聯物(wu)(wu)），與固相(xiang)的(de)(de)特異性的(de)(de)寨(zhai)卡病毒(du)(du)合物(wu)(wu)結合。加(jia)入(ru)(ru)TMB底(di)物(wu)(wu)液(ye)(ye)后，微孔中顯(xian)藍色。顯(xian)色的(de)(de)強(qiang)度與病人樣品(pin)中寨(zhai)卡病毒(du)(du)IgM抗體(ti)的量成正比。加入(ru)終(zhong)止液(ye)終(zhong)止酶反應，形成黃(huang)色終(zhong)點產物。后(hou)在酶標儀處(chu)450 nm讀數。

【檢測方法(fa)】

試(shi)劑準備

試驗前，將所(suo)有試劑，樣品(pin)，質控品(pin)平衡(heng)至室溫(20~25℃)

寨卡病毒抗(kang)原：

每瓶加入1mL稀釋洗滌液溶解，緩慢加入(ru)，室溫(wen)下靜置溫(wen)育15min，制成即用型抗原液。此抗原液在2~8 ℃可穩(wen)定保存1天(tian)。

洗滌液(ye)：

1個單位的(de)濃縮洗滌液+19個單位的(de)雙蒸水。

如：10mL濃縮洗滌(di)液+190 mL雙蒸水。稀釋洗滌液在(zai)室溫下能穩定保存5天。開瓶后，濃縮的(de)洗滌液在(zai)2~8℃可穩定保存至有效期.

檢測步驟

試驗前，仔細(xi)閱讀說明書。嚴格執行說明書要求(qiu)才能得(de)到優質結果。如試驗使用自(zi)動洗板機，建(jian)議每孔350µL，洗板5次（如手工洗，則(ze)每孔300µL，洗板(ban)3次）。試驗前，確定好(hao)樣品(pin)，質控(kong)品(pin)的(de)加樣布局方案。取所需(xu)板(ban)條置于板(ban)架(jia)上。

至少設(she)

1孔（如A1）         空白對照

1孔 (如B1)          陰性(xing)質控

2孔 (如C1+D1）      臨(lin)界質控(kong)

1孔(kong)（如E1）         陽性質控

如(ru)覺得有必要(yao)，建議樣品和質控(kong)品都(dou)作雙份檢測。

試(shi)驗(yan)應(ying)按同樣(yang)的(de)(de)加(jia)樣(yang)順序(xu)加(jia)取試(shi)劑，避(bi)免不(bu)同的(de)(de)時間間隔造成誤差(cha)。

使用新的一次性(xing)加樣(yang)(yang)槍頭，加各質控品，樣(yang)(yang)品

調(diao)節恒溫(wen)箱為37±1℃

• 加50µL質控品和(he)稀釋樣品至相(xiang)應各(ge)孔(kong)中，設A1作為空白對(dui)照(zhao)
• 封板紙蓋板
• 37 ± 1 ℃溫育1小時±5分(fen)鐘
• 溫(wen)育后，移除封板紙，倒出微孔內液體(ti)，每孔用(yong)300µL稀釋(shi)洗(xi)滌(di)液，洗(xi)板(ban)3次，避免(mian)洗(xi)滌(di)液相互溢(yi)濺至其(qi)它微孔。每次洗(xi)板(ban)時，浸泡時間應大(da)于5秒。后，在吸水紙(zhi)上拍干，去除殘留液滴。

注意：洗滌(di)步驟很關鍵。不(bu)(bu)充分的洗板(ban)，會導致不(bu)(bu)精(jing)確或錯誤上升的吸(xi)光度值。

• 除(chu)空(kong)白對照孔(kong)（A1）外，加(jia)50µL基(ji)孔肯雅熱(re)液抗(kang)原液至各孔，蓋(gai)板(ban)
• 室溫(wen)下溫(wen)育30分鐘(zhong)
• 重復步驟4
• 除(chu)空白對照孔（A1）外，加50µL 基孔肯雅(ya)熱液(ye)抗(kang)體液(ye)至(zhi)各孔，蓋板
• 室溫(wen)下溫育(yu)30分鐘
• 重復(fu)步驟(zou)4
• 除(chu)空白(bai)對照孔（A1）外，各加50µL鏈(lian)酶(mei)親和素酶(mei)聯物至(zhi)各孔，蓋板
• 室(shi)溫下溫(wen)育(yu)30分鐘
• 重(zhong)復步驟4
• 加(jia)100 µL TMB底物液(ye)至(zhi)各(ge)孔(kong)中(zhong)
• 黑(hei)暗(an)處，精確溫育(yu)15分(fen)鐘(zhong)
• 按(an)加TMB底物(wu)液(ye)的順序和速度，加100 µL終止液(ye)至各孔中(zhong)。

藍色溶液在孵育過程中變為黃色。

注意：強陽性(xing)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)會導致色原產生沉(chen)(chen)淀，沉(chen)(chen)淀的(de)產生會對讀(du)數產生影響。所(suo)以先用陰性(xing)基質(zhi)進行(xing)預(yu)(yu)稀(xi)釋(shi)，建議1：1的(de)比(bi)例稀(xi)釋(shi)，然后，再1個單(dan)位的(de)預(yu)(yu)稀(xi)釋(shi)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)+100個單(dan)位的(de)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)。終結果（以U計(ji)算）乘以預(yu)(yu)稀(xi)釋(shi)因子2即(ji)可

• 加入終止液后(hou)，30分鐘(zhong)內(nei)，在(zai)酶標(biao)儀450/620 nm處讀(du)數

【結果(guo)計(ji)算】

用A1空白對(dui)照孔對(dui)酶標儀進行(xing)調零

如遇(yu)技術問(wen)題，酶標(biao)儀(yi)不能調零。 所測樣品的吸光(guang)度值減去(qu)空白對照的讀數值，

即(ji)可(ke)得到可(ke)靠的讀數。

在酶標儀處450 nm處測讀所有質控(kong)品(pin)和樣品(pin)的(de)吸光(guang)度值。620 nm作為參考(kao)波長。

如進行雙孔檢測，計算吸(xi)光度(du)均值(zhi)。

實驗有效性標準

如(ru)試驗有效，必須滿足以(yi)下要求

·空白對照（A1）：       吸(xi)光度值(zhi)<  0.100

·陰性質控（B1）：    &nbsp;  吸光(guang)度值<  臨界讀數

·臨(lin)界質(zhi)控(kong)（C1+D1）     吸(xi)光度(du)值   0.150~1.300

·陽(yang)性質控（E1）   &nbsp;    吸光度值>  臨界讀數

如上述標準沒滿足(zu)，試驗(yan)視為(wei)無效，試驗(yan)應(ying)重測。

結(jie)果計算(suan)

臨界讀數是雙(shuang)孔(kong)臨界質控的吸光度均值

示范： 臨(lin)界吸(xi)光度(du)值0.39 +臨(lin)界吸(xi)光度(du)值0.37＝0.76 / 2 = 0.38

即吸光(guang)度值(zhi)＝0.38

德國IBL寨卡病毒抗體IgM檢測試劑,德國IBL寨卡病毒抗體檢測試劑，廣東省總代理！！