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德國IBL漢坦病毒抗體IgM檢測試劑?（酶聯(lian)免疫(yi)法）

【產品名稱】

通用名(ming)稱：德國IBL漢坦病毒抗體IgM檢測試劑

【產(chan)品規格(ge)】

96T/盒

【預(yu)期用途(tu)】

試劑(ji)盒可(ke)用于人(ren)血清和(he)血漿（檸檬酸(suan)鹽(yan)）中漢坦(tan)病毒IgM抗體的定性檢測。

【檢測原理】

試劑盒采用(yong)酶聯免(mian)疫法。微(wei)孔中預包被有抗人IgG，用于結合樣品中相應(ying)的抗體。洗板后，去除非(fei)結合的樣品。再加入漢坦病毒原液(ye)，再次洗板后，再加(jia)(jia)入生物素(su)化的寨卡(ka)病毒抗體。加(jia)(jia)入鏈(lian)霉親和素(su)標記結合物（酶聯物），與固相的特(te)異性(xing)的漢坦病毒合物(wu)(wu)結(jie)合。加入(ru)TMB底物(wu)(wu)液后，微孔中顯藍色。顯色的強度與病人樣品中漢坦病毒IgM抗體的量成正比(bi)。加入終止液終止酶(mei)反應，形(xing)成黃色終點產物(wu)。后在酶(mei)標儀處450 nm讀數。

【檢測方(fang)法】

試劑準備

試驗前，將所(suo)有試劑，樣品，質控品平衡至(zhi)室溫(20~25℃)

漢(han)坦病(bing)毒抗原：

每瓶加入(ru)1mL稀釋洗(xi)滌液(ye)溶解，緩慢加(jia)入，室溫(wen)下靜置溫(wen)育(yu)15min，制成即用型(xing)抗(kang)原液。此抗(kang)原液在2~8 ℃可穩定保存1天。

洗(xi)滌液：

1個單(dan)位的(de)濃縮洗滌液+19個單(dan)位的(de)雙蒸水。

如：10mL濃縮(suo)洗滌液+190 mL雙蒸水。稀釋洗(xi)滌液在室溫下能穩定保(bao)存5天。開瓶后，濃(nong)縮的洗(xi)滌液在2~8℃可(ke)穩(wen)定保存至有效期(qi).

檢測步(bu)驟

試驗前，仔細閱讀說明書(shu)。嚴格(ge)執(zhi)行說明書(shu)要(yao)求才能得到優質(zhi)結果(guo)。如試驗使(shi)用自動(dong)洗板機，建議(yi)每孔350µL，洗板5次（如手工洗，則每(mei)孔(kong)300µL，洗(xi)板3次）。試驗前，確定(ding)好樣品，質控品的加樣布局方案(an)。取(qu)所需板條置于板架上。

至(zhi)少設

1孔（如A1）         空(kong)白對(dui)照

1孔 (如B1)          陰性質控

2孔 (如C1+D1）      臨界質控

1孔（如E1）         陽性(xing)質控

如(ru)覺得(de)有必要(yao)，建議樣品和(he)質(zhi)控品都作雙份檢測。

試(shi)驗(yan)應按同樣的加樣順序加取試(shi)劑，避免不(bu)同的時間間隔造成誤差。

使用新的一次性加(jia)樣槍頭，加(jia)各質控(kong)品，樣品

調節恒溫箱為(wei)37±1℃

• 加50µL質控品和(he)稀釋樣品至相應各孔(kong)中，設A1作(zuo)為空(kong)白對照(zhao)
• 封板(ban)紙蓋板(ban)
• 37 ± 1 ℃溫育1小時(shi)±5分鐘
• 溫(wen)育后，移除封板紙，倒出(chu)微孔內液體(ti)，每孔用300µL稀(xi)釋(shi)洗滌液，洗板3次(ci)，避免洗滌液相互溢濺(jian)至其它(ta)微(wei)孔。每次(ci)洗板時，浸(jin)泡時間應(ying)大于5秒。后，在(zai)吸(xi)水紙(zhi)上拍干(gan)，去除殘留(liu)液滴。

注(zhu)意：洗(xi)滌步驟很(hen)關(guan)鍵(jian)。不(bu)充分(fen)的(de)洗(xi)板，會導致不(bu)精確(que)或錯誤上升(sheng)的(de)吸(xi)光度(du)值。

• 除空白對(dui)照孔（A1）外，加50µL漢坦病(bing)毒液抗原液至各孔，蓋板(ban)
• 室溫下溫育30分鐘
• 重復步驟4
• 除空白對照(zhao)孔(kong)（A1）外，加50µL 漢坦病(bing)毒(du)液抗體液至各孔，蓋板(ban)
• 室溫下(xia)溫育30分鐘
• 重復步驟4
• 除空白對照(zhao)孔（A1）外(wai)，各加50µL鏈酶(mei)親(qin)和(he)素酶(mei)聯物至各孔，蓋板
• 室(shi)溫下溫育30分鐘
• 重復步(bu)驟(zou)4
• 加100 µL TMB底物(wu)液至各孔中
• 黑暗處(chu)，精(jing)確溫育15分鐘
• 按加TMB底物液的順(shun)序和速度，加100 µL終止液至各孔中。

藍色溶(rong)液在孵育過程中變為(wei)黃色。

注意：強陽性(xing)樣品(pin)會(hui)導致色(se)原(yuan)產(chan)生沉淀，沉淀的產(chan)生會(hui)對讀(du)數產(chan)生影響。所以先用(yong)陰性(xing)基質(zhi)進行預(yu)稀(xi)釋(shi)(shi)，建議(yi)1：1的比例稀(xi)釋(shi)(shi)，然后，再1個單(dan)位(wei)的預(yu)稀(xi)釋(shi)(shi)樣品(pin)+100個單(dan)位(wei)的樣品(pin)稀(xi)釋(shi)(shi)液。終結果（以U計算）乘以預(yu)稀(xi)釋(shi)(shi)因子2即可(ke)

• 加入終止液后，30分鐘內，在酶標儀(yi)450/620 nm處(chu)讀數

【結果計算】

用(yong)A1空(kong)白對(dui)照孔(kong)對(dui)酶標(biao)儀進行調(diao)零

如(ru)遇技(ji)術問題，酶標儀不能(neng)調零(ling)。 所測樣(yang)品(pin)的吸光度值(zhi)減去(qu)空白(bai)對照的讀數(shu)值(zhi)，

即可(ke)得(de)到可(ke)靠的讀數。

在酶標(biao)儀處(chu)450 nm處測讀所有質(zhi)控品(pin)和樣(yang)品(pin)的吸光度值。620 nm作(zuo)為參考波(bo)長。

如進行雙孔檢測，計算(suan)吸光(guang)度均值。

實驗(yan)有效性標準

如試驗有效，必(bi)須滿足(zu)以下要求

·空白對照（A1）：   ;    吸(xi)光(guang)度值<  0.100

·陰性質控（B1）：      &nbsp;吸光度值(zhi)<  臨界讀數

·臨界(jie)質控（C1+D1）     吸光度值  &nbsp;0.150~1.300

·陽性(xing)質控(kong)（E1）       &nbsp;吸光度值>  臨(lin)界(jie)讀數

如上述標準沒滿足，試(shi)驗視為無效，試(shi)驗應重測。

結果(guo)計算(suan)

臨界讀數是(shi)雙孔臨界質控的吸(xi)光度(du)均(jun)值

示范： 臨界(jie)(jie)吸光(guang)度值0.39 +臨界(jie)(jie)吸光(guang)度值0.37＝0.76 / 2 = 0.38

即(ji)吸光度值＝0.38

德國IBL漢坦病毒抗體檢測試劑，廣東省總代理！！