登革熱IgG間接法檢測試劑盒
Panbio Dengue IgG Indirect ELISA
產品目錄(lu)號01PE30
預(yu)期用途
Panbio Dengue IgG Indirect ELISA用于(yu)定性檢測登革熱病原血清(qing)型(xing)（1、2、3和4）血清(qing)中(zhong)的IgG抗體，輔助臨床實驗室(shi)診斷出(chu)現臨床癥狀或既(ji)往感染(ran)登(deng)革熱病毒的(de)患者。
概(gai)述(shu)
蟲(chong)媒病毒中的(de)登革熱屬通過蚊子傳播，主要是埃及伊蚊和白紋(wen)伊蚊。 登革熱病毒感(gan)染，與傷寒(han)病有關，其(qi)特征是突然(ran)發熱、劇(ju)烈頭痛、肌痛、關節痛和(he)皮疹(zhen)。 登革(ge)熱(re)感染(ran)的嚴重并發(fa)癥包括登革(ge)出血熱(re)和登革(ge)休克綜(zong)合(he)征(zheng)。此類并發(fa)癥的發(fa)病率(lv)增(zeng)加與(yu)繼發性感染不同登革熱血清型(xing)有關。
通過ELISA對四種登(deng)革熱血清型的IgG類特(te)異性抗體進行檢測，是一種(zhong)診斷既(ji)往感染登革熱病毒的(de)患(huan)者的重要方法。 配對血清中IgG， 水(shui)平不斷升高是活動性登革熱感染的表現。傳統上，血凝抑制試驗（HAI）滴度被用于劃分原發性或繼發性感染。當前的界定方法是采用及時分離至少7天的配對血清標本檢測，急性標本的HAI滴度≥ 1:2560被認為患者感染了繼發性黃病毒1。
檢(jian)測原理(li)
血清中(zhong)存(cun)在的登革熱病毒抗體，與(yu)微孔測試條上聚(ju)苯乙(yi)烯表面附著的登革熱抗原結合(he)物相結合(he)。 洗去剩余的血清并添加過氧(yang)化物酶(mei)標記(ji)的抗(kang)人IgG抗(kang)體(ti)。清洗微孔，再添加無色的底物系(xi)統 - 四(si)甲基(ji)聯苯胺/過氧(yang)化氫（TMB顯色液(ye)）。底物被酶(mei)水解后，顯色液(ye)變藍。用酸終(zhong)止反應后，TMB變黃(huang)。顯色表示測試樣本(ben)中存在登(deng)革(ge)熱IgG抗(kang)體(ti)。
提(ti)供的材料
- 登革熱抗原(yuan)（血(xue)清型1、2、3和4）包被微(wei)孔板(ban)-（12x8孔）。即(ji)用(yong)型。未使用(yong)的微(wei)孔應該立即(ji)重(zhong)新密封并儲存于干燥環境中。有效期(qi)內儲存于2-8℃可(ke)保持穩定(ding)。
- 清(qing)洗緩沖液(ye)（20倍(bei)） - 1瓶，60mL 20倍(bei)濃(nong)縮磷酸鹽(yan)緩沖鹽(yan)水（pH 7.2 – 7.6），含吐溫 20和防腐劑（0.1% Proclin™）。低溫可(ke)能結晶(jing)。若去除結晶(jing)，可(ke)在(zai)37℃孵(fu)育液體至澄(cheng)清。混(hun)合均勻。用(yong)19體積的蒸餾水稀釋1體積的清洗緩沖(chong)液。稀釋后的緩沖(chong)液可(ke)在2-25℃儲存一周。
- 樣(yang)本(ben)稀釋劑(ji) – 2瓶(ping)， 50 mL（粉(fen)色）。即用型(xing)。Tris緩沖生理鹽水(shui)（pH 7.2 – 7.6），含(han)防腐劑(ji)（0.1% Proclin™）和添加(jia)劑(ji)。有效期內儲存于2-8℃可(ke)保持穩定。
- HRP標(biao)記抗人IgG – 1瓶，15mL（綠色）。即用型。辣根過氧化(hua)物酶(mei)（HRP）標記(ji)山羊(yang)抗人IgG，含(han)防腐劑(ji)（0.1% Proclin™）和(he)蛋白穩定劑(ji)。有效(xiao)期內儲存于2-8℃可保持穩定。
- TMB顯色液（TMB） - 1瓶，15mL。即用型。3,3’,5,5'-四(si)甲基聯苯胺(an)和過氧(yang)化氫(qing)的混合物，存放于枸(gou)櫞酸鹽緩(huan)沖液中(zhong)（pH 3.5 – 3.8）。有效期內儲存于2-8℃可保(bao)持穩定。
- 陽性質控品 – 1瓶，紅(hong)色瓶蓋，200μL人血清（含0.1%疊(die)氮話鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持穩(wen)定。
- 校準品 – 1瓶(ping)，黃色瓶蓋，850μL人血清（含0.1%疊(die)氮話鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持穩定。
- 陰性質(zhi)控品 – 1瓶，綠色(se)瓶蓋，200μL人血清（含0.1%疊氮話鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可(ke)保持穩(wen)定。
- 終止液 – 1瓶，紅色瓶蓋，15mL。即(ji)用型。1M磷酸(suan)。有(you)效期內儲存(cun)于2-25℃可(ke)保持穩定。
Proclin™ 300是Rohm 和(he)Haas公司的注冊商(shang)標。
需要但未提供(gong)的(de)材(cai)料
- 精確、可調節的微量(liang)移(yi)液器，含一次性吸液頭(tou)（5-1000 μL容積）
- 去離子(zi)水
- 標(biao)板(ban)清(qing)洗系(xi)統
- 酶標(biao)儀，含450nm濾波器(qi)
- 計時器
- 刻度(du)量(liang)筒
- 燒瓶(ping)
- 試(shi)管(guan)或微滴定板，用(yong)于稀釋血清
注意(yi)事項(xiang)
用于(yu)體(ti)外診斷(duan)
- 在制(zhi)備(bei)質(zhi)(zhi)控(kong)品的過程中使用的所有人源性(xing)材(cai)料(liao)已經過人類免疫缺陷病毒(du)1/2（HIV 1 /2）抗體、丙肝(gan)（HCV）和乙肝(gan)表面(mian)抗原的檢測，結(jie)果為陰性(xing)。但是，任何測試方法都(dou)不能*確信，且所有人源性(xing)質(zhi)(zhi)控(kong)品和抗原包被微(wei)孔(kong)板都(dou)應按照潛(qian)在傳染性(xing)材(cai)料(liao)處理。疾病控(kong)制(zhi)和預(yu)防(fang)中心以及(ji)美國國立衛生研(yan)究院(yuan)建議將潛(qian)在傳染原按照生物安全二級2處理。
- 該(gai)測試只能使(shi)用(yong)血(xue)清執(zhi)行(xing)。尚未建立使(shi)用(yong)全血(xue)、血(xue)漿或其它標本基質的方(fang)法。
- 不(bu)可使用黃疸或脂血癥血清，以及出(chu)現溶血或微生物(wu)生長的血清。
- 不可加熱，否(fou)則血清將失去活(huo)性。
- 在開始檢測前(qian)所有試劑必須平衡至室溫(wen)（20-25℃）。檢(jian)測受溫度變化的影響。微孔板在達到室溫（20-25℃）之(zhi)前不可從(cong)密封袋中取出。
- 直接(jie)用干凈的吸液頭從試(shi)劑(ji)(ji)瓶中吸出(chu)試(shi)劑(ji)(ji)。轉移試(shi)劑(ji)(ji)可能(neng)導致污染。
- 未(wei)使用(yong)的微孔(kong)應(ying)該(gai)立即重新(xin)密封并儲存于干燥環境中(zhong)。否則將產生錯誤結(jie)果(guo)。
- 底物系統：
- 由于TMB易(yi)受金屬(shu)離子(zi)的污(wu)染，所以底物系統不能(neng)與金屬(shu)表(biao)面接觸(chu)。
- 避免長時間陽光直射。
- 有(you)些(xie)清(qing)潔劑(ji)可干擾(rao)TMB的性能。
- TMB可能呈現(xian)淡藍色，這不影響底(di)物的活性(xing)或測定(ding)結果。累積。
- 疊氮話鈉還抑制酶標物的活性。在添加酶標物時必須使用干凈的吸液頭，避免攜帶其它試劑的疊(die)氮話鈉。
登革熱IgG間接法檢測試劑盒
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