亚洲成a人片在线观看中文_国语自产偷拍精品视频偷拍_人妻少妇久久中文字幕一区二区_国产精品久久久久精品日日

登革熱病毒捕獲法IgG抗體檢測試劑盒

Panbio Dengue IgG Capture ELISA

產品目錄號01PE10

預期用途(tu)

Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于推斷性定性檢測登革(ge)熱病毒(du)（1-4血清型）繼(ji)發性感(gan)染患者的(de)IgG抗體升高，輔(fu)助臨床實(shi)驗室診斷出(chu)現登(deng)革(ge)(ge)熱病毒感染臨(lin)床癥(zheng)狀(zhuang)的患者，而且應(ying)該與Panbio Dengue IgM Capture ELISA 和Dengue Early ELISA聯用。Dengue Early ELISA也可(ke)檢(jian)測原發性登(deng)革(ge)(ge)熱病毒感染。Panbio Dengue IgG Capture ELISA早可(ke)在疾病發作后3天檢(jian)測到提示(shi)繼發性登(deng)革熱感染的高IgG, 水平。然而，準確診斷繼發性感染的峰值檢測窗口是在疾病發作后6-15天。陽性結果是推斷出來的，必須經過病毒分離培養、配對血清分析、免疫組織化學抗原檢測或病毒核酸檢測來確認登革熱病毒感染。

概述

登革(ge)熱病(bing)毒是黃病(bing)毒屬，主要分(fen)布于熱帶(dai)和亞熱帶(dai)地(di)區。世界上(shang)一半以上(shang)的人口居住于具有登革(ge)熱潛在(zai)傳播風險(xian)的地(di)區，登革(ge)熱是導致人類發病和死亡(wang)嚴(yan)峻的蟲媒病(bing)毒疾病(bing)¹。登(deng)革熱病(bing)毒有4種不同但抗原相關的血清型(xing)，通過雌蚊（主要是埃及伊蚊、白紋(wen)伊蚊傳播和波利尼西亞斑蚊）傳(chuan)播。

登(deng)(deng)革(ge)熱(re)病毒感(gan)染的(de)臨床表現各不相(xiang)同，從亞臨床表現到致命(ming)。依(yi)據嚴重程度，該疾(ji)病被分(fen)為(wei)以(yi)下等(deng)級(ji)(ji)：非特(te)異性(xing)發熱(re)疾(ji)病，典型登(deng)(deng)革(ge)熱(re)，登(deng)(deng)革(ge)出血熱(re)（DHF）（1級(ji)(ji)和2級(ji)(ji)），和登(deng)(deng)革(ge)休克綜合征（DSS）（3級(ji)(ji)和4級(ji)(ji)）¹。典型登(deng)革(ge)熱的特征是突(tu)然發(fa)熱并至少伴隨以(yi)下2種癥(zheng)狀：頭痛，眼眶后疼痛，肌痛，關節痛，皮疹，出血表現(xian)，和(he)白血球減少(shao)癥²。雙相(xiang)發(fa)熱(re)病程常見(jian)失(shi)眠和厭(yan)食，失(shi)去味覺或口苦(ku)。DHF和DSS是(shi)嚴重(zhong)的潛在致命性并發(fa)癥，通常與感(gan)染(ran)第二種血(xue)清型有關³。

在地方性流行登(deng)革熱感(gan)染的國家，大(da)部(bu)分(fen)成年患者會出(chu)現繼發(fa)性登(deng)革熱感(gan)染⁴。利用(yong)ELISA方法檢(jian)測登(deng)革熱病(bing)毒的(de)IgG抗(kang)體(ti)特(te)異性升高(gao)是鑒(jian)別繼發(fa)性(xing)登革熱感(gan)染非常重(zhong)要的診斷方法(fa)。繼發(fa)性(xing)感染患者并(bing)發(fa)癥(zheng)的發(fa)生幾率較高^5,6。傳統(tong)上，血凝(ning)抑制試驗（HAI）滴度被(bei)用(yong)于劃(hua)分(fen)原發(fa)性或繼發(fa)性感(gan)染(ran)。當前的(de)界定(ding)方法是采用及時分離至(zhi)少7天的(de)配對血(xue)清標本檢測，急性標本的(de)HAI滴度> 1:1280被認為患者(zhe)感(gan)染了(le)繼發性(xing)黃病毒(du)⁷。

Panbio Dengue IgG Capture ELISA是除HAI檢測之外(wai)另一種可(ke)對繼(ji)發性(xing)登革(ge)熱感染的血(xue)清學(xue)進行診斷(duan)的方法。

如(ru)下所示，繼發性登革熱病毒(du)感(gan)染(ran)的特征表(biao)現為高IgG ,水(shui)平，同時可能伴隨IgM水平升高⁸。Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于(yu)檢測登革熱感(gan)染(ran)的IgG抗體(ti)水(shui)(shui)平(ping)相對于(yu)閾值特異性升高。該試(shi)驗不用于(yu)檢測既往感(gan)染(ran)引(yin)起的低水(shui)(shui)平(ping)IgG抗體(ti)，這種情況通常見于(yu)地方(fang)性流(liu)行區的較多(duo)人群(qun)。因此，高IgG ,水(shui)平（> 22 Panbio單位）提示繼(ji)發(fa)性登革熱(re)病毒感染。

檢測原理

血清中(zhong)(zhong)存在(zai)的登革熱(re)病毒IgG抗體，與微孔測(ce)試條（測(ce)定板）上聚苯乙烯表(biao)(biao)面(mian)包(bao)被(bei)的抗人(ren)IgG抗體結合。用抗原稀(xi)釋(shi)劑將(jiang)濃縮的重組登革熱(re)1-4型抗原溶液稀(xi)釋(shi)到正確的工作容積。用昆蟲細胞表(biao)(biao)達(da)系統產生抗原，用特異性(xing)單克隆(long)抗體純化(hua)抗原。在(zai)稀(xi)釋(shi)后的抗原中(zhong)(zhong)添加等(deng)體(ti)積的(de)(de)辣根過氧(yang)(yang)化(hua)(hua)物(wu)酶（HRP）標記單克隆抗(kang)體(ti)（MAb），形成抗(kang)原(yuan)MAb復合(he)物(wu)。清洗測(ce)定板上(shang)的(de)(de)剩余血清，將抗(kang)原(yuan)MAb復合(he)物(wu)添加到測(ce)定板中。然(ran)后(hou)(hou)這些抗(kang)原(yuan)MAb復合(he)物(wu)與(yu)血清登革熱(re)特異(yi)性IgG抗(kang)體(ti)結合(he)。在(zai)培養完成后(hou)(hou)清洗微孔，再添加無色(se)(se)的(de)(de)底(di)物(wu)系統 - 四甲基聯苯胺/過氧(yang)(yang)化(hua)(hua)氫(qing)（TMB顯(xian)色(se)(se)液(ye)）。底(di)物(wu)被HRP（如存在(zai)）水解后(hou)(hou)，顯(xian)色(se)(se)液(ye)變藍。用酸終止反(fan)應(ying)后(hou)(hou)，TMB變黃(huang)。顯(xian)色(se)(se)表示測(ce)試樣(yang)本中存在(zai)抗(kang)登革熱(re)IgG抗(kang)體(ti)。

提供的材料

• 抗人IgG包被微孔 - （測定板）
  （12x8孔(kong)）。即用(yong)型。未使用(yong)的微孔(kong)應該立(li)即重新密封并儲存(cun)于干(gan)燥環境中。有效(xiao)期內儲存(cun)于2-8℃可保持穩定。
• 登革熱1-4型抗原(yuan)（重組） - 1瓶(ping)，無色(se)瓶蓋，包含(han)150μL（紅(hong)色）濃縮的1型、2型、3型和4型登革熱病(bing)毒(du)抗原(yuan)。未(wei)使用的稀(xi)釋抗原(yuan)必須丟棄(qi)。濃縮抗原(yuan)在有效期內儲存(cun)于(yu)2-8℃可保持穩定(ding)。
• 清洗緩(huan)沖液(ye)（20倍(bei)） - 1瓶，60mL 20倍(bei)濃縮磷酸鹽(yan)緩(huan)沖鹽(yan)水（pH 7.2 – 7.6），含吐溫(wen) 20和(he)防腐劑（0.1% Proclin™）。低溫(wen)可(ke)能結晶。若(ruo)去除結晶，可在37℃孵育(yu)液體至澄清(qing)。混合均勻。用19體(ti)積的蒸餾水稀釋1體(ti)積的清(qing)洗緩沖(chong)液(ye)。稀釋后的緩沖(chong)液(ye)可在2-25℃儲(chu)存一(yi)周。
• 樣本稀釋劑 – 2瓶， 50 mL（粉(fen)色）。即用型。Tris緩沖生理鹽水（pH 7.2 – 7.6），含防腐劑(ji)（0.1% Proclin™）和添(tian)加劑(ji)。有效期內儲存于2-8℃可保(bao)持穩定(ding)。
• 抗(kang)原稀釋劑(ji) – 1瓶(ping)，50mL（無色）。即用型。磷酸鹽緩沖液，含防腐劑（0.1% Proclin™和0.005%慶大霉素）。有(you)效期內儲存于2-8℃可保(bao)持穩定。
• HRP標記單克(ke)隆抗體示(shi)蹤劑 – 1瓶，7mL（綠色）。即用型。辣(la)根過氧化(hua)物酶（HRP）標記單克隆抗體示(shi)蹤(zong)劑，含防腐劑(ji)（0.1% Proclin™）和蛋白穩定劑(ji)。有效期內儲存(cun)于2-8℃可保(bao)持穩定。
• TMB顯色液（TMB） - 1瓶，15mL。即(ji)用型。3,3’,5,5'-四(si)甲(jia)基(ji)聯苯胺和(he)過氧化氫的混合物，存(cun)放于(yu)枸櫞酸鹽緩沖液中（pH 3.5 – 3.8）。有效期內儲存(cun)于(yu)2-8℃可(ke)保(bao)持穩定。
• 反應控制(zhi)品(pin) – 1瓶(ping)，紅色(se)瓶蓋，200μL人血清（含0.1%疊(die)氮話(hua)鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持穩(wen)定(ding)。
• 校準品 – 1瓶，黃色瓶蓋，850μL人血清（含0.1%疊氮話鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持(chi)穩定。
• 陰性質控品(pin) – 1瓶，綠色瓶蓋，200μL人血清（含0.1%疊氮話鈉(na)和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持穩定。
• 終止液 – 1瓶，紅色瓶(ping)蓋，15mL。即用型。1M磷(lin)酸。有效(xiao)期內儲(chu)存于2-25℃可保持(chi)穩定。

Proclin™ 300是Rohm 和Haas公司(si)的注冊(ce)商標。

需(xu)要但(dan)未提供(gong)的(de)材料(liao)

• 精確、可調節的微量移液器，含一次性吸液頭（5-1000 μL容積(ji)）
• 去離子水
• 標(biao)板(ban)清洗系統
• 酶標(biao)儀(yi)，含450nm濾波(bo)器
• 計時器
• 刻度量(liang)筒
• 燒瓶
• 試管(guan)或微滴定(ding)板，用于稀釋血清

注意(yi)事項

用于體外診斷

• 在(zai)制(zhi)備(bei)質(zhi)控(kong)品的(de)過程中使用(yong)的(de)所有人源性材料已經過人類免疫(yi)缺陷病(bing)毒1/2（HIV 1 /2）抗(kang)體、丙(bing)肝(gan)（HCV）和乙(yi)肝(gan)表面抗(kang)原的檢(jian)測(ce)，結果為陰(yin)性。但是，任何測(ce)試方(fang)法都不能*確信(xin)，且所有人源性質控(kong)品和抗原都應(ying)按照潛在(zai)傳(chuan)染性材(cai)料處理。疾(ji)病控(kong)制和預防中心(xin)以及美國國立(li)衛生研究院建議將潛傳染原按(an)照生物安(an)全二(er)級處理。
• 該(gai)測試(shi)只能使(shi)(shi)用血(xue)清執行。尚未建立使(shi)(shi)用全血(xue)、血(xue)漿或其它(ta)標本基質的方法。
• 不可使用黃疸或脂血(xue)(xue)(xue)癥血(xue)(xue)(xue)清，以及出現溶(rong)血(xue)(xue)(xue)或微生(sheng)物生(sheng)長的血(xue)(xue)(xue)清。
• 不可加熱，否則血清(qing)將失(shi)去活性。
• 在開始(shi)檢測(ce)前(qian)所有(you)試(shi)劑(ji)必須(xu)平(ping)衡至室溫(wen)（20-25℃）。檢(jian)測(ce)受溫度變化的影響。微(wei)孔板在達到室溫（20-25℃）之前(qian)不可從密(mi)封袋中取出。
• 直接用干(gan)凈的吸(xi)液頭從試劑瓶中吸(xi)出試劑。轉移(yi)試劑可能(neng)導致污(wu)染。
• 未使用的微孔(kong)應該立即重新密封并儲存于干燥環境中，否則將產生錯誤結果。
• 底物(wu)系統：

• 由于TMB易受金屬離子的(de)污染，所以底物系統不能與金屬表(biao)面接觸。
• 避免長時間(jian)陽光直射。
• 有(you)些清潔(jie)劑可干擾TMB的性(xing)能。
• TMB可能呈(cheng)現淡藍色，這不(bu)影(ying)響底物(wu)的活性或(huo)測定(ding)結果。

 登革熱病毒捕獲法IgG抗體檢測試劑盒