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登革熱病毒間接法IgG抗體檢測試劑盒

Panbio Dengue IgG Indirect ELISA 

產品目錄號01PE30

預期用途

Panbio Dengue IgG Indirect ELISA用于定性檢測(ce)登革熱(re)病原血清型（1、2、3和4）血清中的IgG抗體，輔(fu)助臨床實驗室診斷出現臨床癥狀或既往感染登(deng)革熱病毒的(de)患者。

概述

蟲媒(mei)病(bing)毒中的登革熱屬(shu)通過蚊子傳播，主要是埃(ai)及伊蚊和白紋伊蚊。 登革熱(re)病毒感染，與傷寒病有(you)關(guan)，其特征是突(tu)然發熱(re)、劇烈頭痛(tong)、肌痛(tong)、關(guan)節痛(tong)和皮疹。 登(deng)革熱(re)感(gan)染(ran)的嚴重并發(fa)癥包括登(deng)革出血熱(re)和登(deng)革休克綜合征。此類(lei)并發(fa)癥的(de)發病率增加與繼發性感染(ran)不同登革熱血清型有(you)關。

通過(guo)ELISA對四種登革熱血清型(xing)的IgG類特異性抗體(ti)進行檢(jian)測，是(shi)一種診斷既往感染登革熱病毒的(de)患者的重要方(fang)法。 配對血清中(zhong)IgG, 水平不斷升高是活動性登革熱感染的表現。傳統上，血凝抑制試驗（HAI）滴度被用于劃分原發性或繼發性感染。當前的界定方法是采用及時分離至少7天的配對血清標本檢測，急性標本的HAI滴度≥ 1:2560被認為患者感染了繼發性黃病毒¹。

檢測(ce)原理(li)

血清中(zhong)存在的登革(ge)熱病毒抗體，與微孔(kong)測試條(tiao)上聚(ju)苯乙烯表面附(fu)著的登革(ge)熱抗原結合物相(xiang)結合。 洗(xi)(xi)去剩余的(de)血清并添加過氧化(hua)物酶標(biao)記的(de)抗人IgG抗體。清洗(xi)(xi)微孔，再(zai)添加無(wu)色的(de)底(di)物系統 - 四甲基聯(lian)苯胺(an)/過氧化(hua)氫(qing)（TMB顯(xian)色液）。底(di)物被酶水解后(hou)，顯(xian)色液變藍。用酸終止反應后(hou)，TMB變黃。顯(xian)色表(biao)示測試樣本中存(cun)在登革熱IgG抗體。

提供的材料

• 登革熱抗原(yuan)（血清型(xing)1、2、3和4）包(bao)被微(wei)孔板-（12x8孔）。即用(yong)型(xing)。未使(shi)用(yong)的微(wei)孔應該立(li)即重新密封并(bing)儲存(cun)于干燥環境中。有(you)效期內儲存(cun)于2-8℃可保(bao)持穩定。
• 清洗緩沖(chong)液（20倍(bei)） - 1瓶，60mL 20倍(bei)濃縮磷酸鹽(yan)緩沖(chong)鹽(yan)水（pH 7.2 – 7.6），含(han)吐溫 20和防腐劑(ji)（0.1% Proclin™）。低溫可能結晶。若去除結晶，可在37℃孵(fu)育液體至澄清。混(hun)合均勻。用19體積的蒸餾水(shui)稀釋1體積的清洗緩沖液。稀釋后的緩沖液可在2-25℃儲存一周。
• 樣本稀釋劑(ji) – 2瓶， 50 mL（粉色）。即用型。Tris緩沖生理鹽(yan)水（pH 7.2 – 7.6），含防腐(fu)劑(ji)（0.1% Proclin™）和(he)添加劑(ji)。有效期(qi)內儲存于2-8℃可保持(chi)穩定。
• HRP標記抗人IgG – 1瓶，15mL（綠色(se)）。即用型。辣根過氧化物酶(mei)（HRP）標(biao)記山羊抗人IgG，含(han)防腐(fu)劑（0.1% Proclin™）和(he)蛋白穩定劑。有效期內儲(chu)存于2-8℃可保持穩(wen)定。
• TMB顯色(se)液(ye)（TMB） - 1瓶，15mL。即用型(xing)。3,3’,5,5'-四甲基聯苯(ben)胺和過氧化氫的混合物，存放于(yu)枸櫞酸鹽緩沖液(ye)中（pH 3.5 – 3.8）。有(you)效(xiao)期(qi)內儲存于(yu)2-8℃可保持穩定。
• 陽性質(zhi)控品 – 1瓶，紅(hong)色(se)瓶蓋，200μL人血清（含0.1%疊(die)氮HUA鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可(ke)保持穩定。
•  校(xiao)準(zhun)品 – 1瓶，黃(huang)色瓶蓋，850μL人血清（含0.1%疊氮HUA鈉(na)和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持(chi)穩定。
• 陰性質控品 – 1瓶(ping)，綠色瓶蓋，200μL人血清（含0.1%疊氮HUA鈉和0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于2-8℃可保持穩定。
• 終(zhong)止液 – 1瓶，紅色(se)瓶(ping)蓋(gai)，15mL。即(ji)用(yong)型。1M磷酸。有(you)效期(qi)內儲存于2-25℃可保持穩定。

Proclin™ 300是Rohm 和Haas公(gong)司的注冊商標。

需要但未提(ti)供(gong)的材(cai)料

• 精確、可調節的(de)微量移液器，含(han)一次性吸(xi)液頭(tou)（5-1000 μL容積）
• 去離子水
• 標板清洗系統
• 酶標儀，含450nm濾波器
• 計時器
• 刻度量筒
• 燒瓶
• 試管或微滴定板(ban)，用于(yu)稀釋血(xue)清

注意事項

用于(yu)體(ti)外診斷

• 在(zai)制(zhi)備(bei)質(zhi)控品的(de)過程中使(shi)用的(de)所有人(ren)源性(xing)材料(liao)已經過人(ren)類免疫缺陷病(bing)(bing)毒(du)1/2（HIV 1 /2）抗(kang)體、丙肝（HCV）和乙(yi)肝表面(mian)抗(kang)原的(de)檢測，結果為(wei)陰性(xing)。但是，任何測試方法都(dou)不能(neng)*確信，且所有人(ren)源性(xing)質(zhi)控品和抗(kang)原包被微孔(kong)板都(dou)應按照潛(qian)在(zai)傳染(ran)性(xing)材料(liao)處理。疾病(bing)(bing)控制(zhi)和預防中心以及(ji)美國國立衛生研究院建(jian)議(yi)將潛(qian)在(zai)傳染原按照(zhao)生物(wu)安全二級(ji)²處理。
• 該測試只(zhi)能使(shi)用血清執(zhi)行。尚未建(jian)立使(shi)用全血、血漿或其它標本基質(zhi)的方法。
• 不可使(shi)用黃疸(dan)或脂血癥血清，以及出現溶(rong)血或微(wei)生物生長的血清。
• 不(bu)可(ke)加熱，否則血(xue)清將失去活性。
• 在開(kai)始檢(jian)測前所有試劑必須(xu)平衡至(zhi)室溫（20-25℃）。檢測受溫度(du)變化的影響。微孔板在達(da)到(dao)室溫（20-25℃）之前(qian)不可從密封袋中取出(chu)。
• 直(zhi)接(jie)用(yong)干凈的吸(xi)液頭從試劑瓶(ping)中(zhong)吸(xi)出試劑。轉移試劑可能導致(zhi)污染(ran)。
• 未使(shi)用的微孔應(ying)該(gai)立即重新密(mi)封(feng)并儲存于干(gan)燥環境中。否則將產生錯誤結果。
• 底物系(xi)統：
  • 由于TMB易(yi)受(shou)金屬離子的污染，所(suo)以底(di)物系統不能(neng)與金屬表(biao)面接觸。
  • 避免長時間陽(yang)光直射。
  • 有些(xie)清潔劑可(ke)干擾TMB的性(xing)能(neng)。

TMB可能呈現(xian)淡(dan)藍色(se)，這(zhe)不(bu)影響底物的活性或測(ce)定結果。

登革熱病毒間接法IgG抗體檢測試劑盒